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本试剂盒可用于从血液中分离完整而纯化的线粒体。其制备物，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。但不适用于进一步线粒体DNA提取。

10×红细胞裂解液用双蒸水稀释10倍成1×红细胞裂解液（如标本为有核红细胞血液，此试剂用不上，需自备生理盐水或者PBS）。准备适当去尖吸头，全程清洗请不要用带尖吸头。

• 为保证获得完整及尽可能多的线粒体，匀浆条件要示：第一是全程低温操作。第二是快速。第三，如有条件可将匀浆后的碎片在显微镜下观察。
  
• 一般低温离心机都有离心力显示，如果没有，不同的离心机可根据第二页公式精确计算离心速度。
  
• 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解线粒体。

• 血液处理：
  血液要求：抗凝血，最好使用新鲜血液。对于冻存血液，由于冻凝过程中冰晶已经对细胞膜和线粒体膜产生损伤，所以线粒体得率会大大减少，并且完整性也会降低。
  
  • 对于无核红细胞全血（如哺乳动物外周血），取血约5mL（适当分成几管），加入3倍体积的1×红细胞裂解液，混匀，800×g 5min离心收集白细胞。再加入1～2mL 1×红细胞裂解液，吹打重悬白细胞，合并于一管中，800×g 5～10min离心收集白细胞。此时如果白细胞有可见红色，可再次用少量(0.5mL) 1×红细胞裂解液洗细一次。
    
  • 对于有核红细胞全血（如禽类全血），取约200～300μL全血，800×g 5～10min离心收集全细胞，用生理盐水或者PBS清洗两次，留沉淀去上清。
• 在收集到的细胞中，加入1.0mL冰预冷的细胞裂解液重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨20～40次；
  
• 匀浆物转移到离心管，4℃，1000×g离心5min；
  
• 取上清，加入一新的离心管中，4℃，1000×g再次离心5min（一共两次离心，完整去核）；
  
• 取上清，加入一新的离心管中，4℃，12000×g离心10min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管留用或者直接丢弃，线粒体沉淀在管底；
  
• 在线粒体沉淀中加入0.5mL线粒体清洗液重悬线粒体沉淀，4℃，1000×g离心5min(再次去核）；
  
• 取上清，加入一新的离心管中，4℃，12000×g离心10min，弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底；
  
• 用50～100μL线粒体保存液或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。