产品货号：
XH004
中文名称：
血液线粒体提取试剂盒
英文名称：
Blood Mitochondrion Extraction Kit
产品规格：
50T|100T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒可用于从血液中分离完整而纯化的线粒体。其制备物，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。但不适用于进一步DNA提取。
试剂盒组成：
保存条件：4℃可保存3个月，长期保存可置-20℃。
操作步骤：
1．血液处理：
血液要求：非肝素钠抗凝血，最好使用新鲜血液。对于陈旧血液，由于冻凝过程中冰晶已经对细胞核膜和线粒体膜产生损伤，所以线粒体得率会大大减少，并且完整性也会降低。
a．对于无核红细胞全血（如哺乳动物处周血），取血约5ml（适当分成几管），加入3倍体积的红细胞裂解液（稀释后的工作液,下同），混匀，800×g 5min离心收集白细胞。加入1-2ml红细胞裂解液（稀释后的工作液），吹打重悬白细胞，合并于一管中，800×g 5～10min离心收集白细胞。此时如果白细胞有可见红色，可再次用少量(0.5ml)红细胞裂解液洗细一次。
b．对于有核红细胞全血（如禽类全血），取约200-300μl全血，800×g 5～10min离心收集全细胞，用生理盐水或者PBS清洗两次，留沉淀去上清。清洗时请用去尖吸头吹打。
2．在收集到的细胞中，加入1.0mL冰预冷的白细胞裂解液重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨20~40次；
3．匀浆物转移到离心管，4℃，1000×g离心5min；
4．取上清，加入一新的离心管中，4℃，1000×g再次离心5min（一共两次离心，完整去核）。
5．取上清，加入一新的离心管中，4℃，12,000×g离心10min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底；
6．在线粒体沉淀中加入0.5 mL线粒体清洗液重悬线粒体沉淀，4℃，1000×g离心5min(再次去核）；
7．取上清，加入一新的离心管中，4℃，12,000×g离心10min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底；
8．用50 -100μL线粒体保存液或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。
注意事项：
为保证获得完整及尽可能多的线粒体，匀浆条件要示：第一是全程低温操作。第二是快速。第三，如有条件可将匀浆后的碎片在显微镜下观察。
一般低温度心机都有离心力显示，如果没有，可以用以下公式简单的换算。
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍数来表示；[rpm]2即：转速的平方；R为半径，单位为厘米。
相关搜索：血液线粒体提取试剂盒，Blood Mitochondrion Extraction Kit
试剂盒组成：
| 组份 | 50T | 100T |
| 红细胞裂解液（10X） | 100mL | 100mL×2 |
| 白细胞裂解液 | 50mL | 100mL |
| 线粒体清洗液 | 25mL | 50mL |
| 线粒体保存液 | 5mL | 10mL |
保存条件：4℃可保存3个月，长期保存可置-20℃。
操作步骤：
1．血液处理：
血液要求：非肝素钠抗凝血，最好使用新鲜血液。对于陈旧血液，由于冻凝过程中冰晶已经对细胞核膜和线粒体膜产生损伤，所以线粒体得率会大大减少，并且完整性也会降低。
a．对于无核红细胞全血（如哺乳动物处周血），取血约5ml（适当分成几管），加入3倍体积的红细胞裂解液（稀释后的工作液,下同），混匀，800×g 5min离心收集白细胞。加入1-2ml红细胞裂解液（稀释后的工作液），吹打重悬白细胞，合并于一管中，800×g 5～10min离心收集白细胞。此时如果白细胞有可见红色，可再次用少量(0.5ml)红细胞裂解液洗细一次。
b．对于有核红细胞全血（如禽类全血），取约200-300μl全血，800×g 5～10min离心收集全细胞，用生理盐水或者PBS清洗两次，留沉淀去上清。清洗时请用去尖吸头吹打。
2．在收集到的细胞中，加入1.0mL冰预冷的白细胞裂解液重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨20~40次；
3．匀浆物转移到离心管，4℃，1000×g离心5min；
4．取上清，加入一新的离心管中，4℃，1000×g再次离心5min（一共两次离心，完整去核）。
5．取上清，加入一新的离心管中，4℃，12,000×g离心10min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底；
6．在线粒体沉淀中加入0.5 mL线粒体清洗液重悬线粒体沉淀，4℃，1000×g离心5min(再次去核）；
7．取上清，加入一新的离心管中，4℃，12,000×g离心10min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底；
8．用50 -100μL线粒体保存液或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。
注意事项：
为保证获得完整及尽可能多的线粒体，匀浆条件要示：第一是全程低温操作。第二是快速。第三，如有条件可将匀浆后的碎片在显微镜下观察。
一般低温度心机都有离心力显示，如果没有，可以用以下公式简单的换算。
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍数来表示；[rpm]2即：转速的平方；R为半径，单位为厘米。
相关搜索：血液线粒体提取试剂盒，Blood Mitochondrion Extraction Kit